Ku-70 Protein DNA修復酶Ku70抗原是DNA依賴的蛋白激酶(DNA-PK)的調(diào)節(jié)亞基,在DNA修復過程中發(fā)揮著關鍵作用。其工作原理主要圍繞對DNA雙鏈斷裂(DSBs)的識別與修復展開。
當細胞內(nèi)的DNA受到外界因素如電離輻射、化學試劑等影響,或者在正常的生理過程中出現(xiàn)復制錯誤時,會導致DNA雙鏈斷裂。此時,Ku70與Ku80結合形成Ku異二聚體,這一復合物能夠迅速識別并結合到DNA雙鏈斷裂的末端。Ku異二聚體具有較高的親和力和特異性,它可以包裹住DNA斷端,防止DNA末端的降解以及不必要的核酸酶切割,從而穩(wěn)定了受損的DNA結構。
在結合到DNA斷端后,Ku異二聚體招募DNA -PK的催化亞基(DNA -PKcs),形成完整的DNA -PK復合物。該復合物能夠使下游的修復蛋白如ATM(共濟失調(diào)毛細血管擴張癥突變蛋白)等相關蛋白磷酸化,從而激活一系列的信號傳導通路。這些被激活的信號通路會促進非同源末端連接(NHEJ)修復途徑的進行。在NHEJ過程中,Ku70參與調(diào)控DNA斷端的加工處理,例如去除受損的堿基或核苷酸,以確保DNA斷端的準確性和完整性,為后續(xù)的DNA連接酶發(fā)揮作用創(chuàng)造條件,實現(xiàn)DNA雙鏈斷裂的準確修復,維持基因組的穩(wěn)定性。
Ku-70 Protein DNA修復酶Ku70抗原的使用注意事項:
1.抗體質(zhì)量與特異性:
-確保使用的抗體具有高特異性和親和力,以避免非特異性結合和背景干擾。
-在使用新批次的抗體時,應進行預實驗驗證其性能和特異性。
2.樣本處理:
-樣本的提取和處理過程應盡可能溫和,以避免蛋白質(zhì)降解或修飾。
-確保樣本中沒有抑制劑或干擾物質(zhì),這些物質(zhì)可能影響抗原-抗體反應的效率。
3.實驗條件控制:
-嚴格控制實驗條件,包括溫度、時間、pH值等,以確保實驗的穩(wěn)定性和可重復性。
-在實驗過程中,應設置適當?shù)膶φ?如空白對照、陰性對照和陽性對照),以驗證實驗的準確性和可靠性。
4.數(shù)據(jù)解讀與報告:
-對實驗數(shù)據(jù)進行仔細分析,避免主觀臆斷或誤讀。
-在報告實驗結果時,應提供詳細的實驗方法、數(shù)據(jù)和結論,以便他人能夠重復驗證。
5.安全與環(huán)保:
-在實驗過程中,應遵守實驗室安全規(guī)定,正確處理和使用化學試劑和生物材料。
-實驗結束后,應妥善處理廢棄物,以保護環(huán)境和人員健康。